Expression, purification and cellular uptake of a S100A4 protein, Fachbücher von Stian Sjøli

Das Buch "Expression, purification and cellular uptake of a S100A4 protein" von Stian Sjøli bietet eine detaillierte Untersuchung der Herstellung und Aufreinigung des rekombinanten S100A4-Proteins in Pichia pastoris. Es beschreibt die Verwendung eines Expressionsvektors, der Teile des AOX1-Promotors und ein Sekretionssignal enthält, um die Proteinproduktion nach Methanolinduktion zu ermöglichen. Die Aufreinigung des Proteins erfolgt durch hydrophobe Interaktionschromatographie (HIC) und anionenaustauschende Chromatographie (IEC). Trotz einer niedrigen Bindungskapazität an hydrophobe Materialien zeigt das elutierte Protein eine akzeptable Reinheit für nachfolgende funktionale Assays. Darüber hinaus wird die Verwendung des mit dem fluoreszierenden Farbstoff Cy3 markierten Proteins in Internalisierungsstudien an der menschlichen Zelllinie HeLa behandelt. Die Ergebnisse zeigen, dass das in Pichia produzierte Protein erfolgreich in die HeLa-Zellen internalisiert wird, was auf interessante biologische Implikationen hinweist, die weiter untersucht werden müssen.